mammoleptin.ru |
Единственный производитель: Фармацевтическая компания Хербапекс (групп) Ко. Лтд. (Китай)
Зарегистрирован компанией Дао-Фарм в странах: Азербайджан, Грузия, Россия.
При поддержке Фонда содействия изучению и внедрению лекарственных средств растительного, животного и минерального происхождения
Мониторинг самых низких цен
Отчет об изучении влияния биологически активной добавки Маммолептин на развитие экспериментальных опухолей |
«УТВЕРЖДАЮ» Директор НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН, академик РАМН Е.Д.Гольдберг 27 октября 2000 г. ОТЧЕТ № 1
об изучении влияния биологически активной добавки Маммолептин на развитие экспериментальных опухолей Томск – 2000 г. 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперименты выполнены на 55 мышах-самках беспородных, 30 линии С57В1/6
и 58 линии F1 (СВАхС57В1/6), полученных из научно-исследовательской
лаборатории экспериментального биомоделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (сертификат № 161-99).
Животные содержались в типовом виварии на обычном рационе питания. Перед началом опыта мышей выдерживали
с целью адаптации к условиям вивария в течение 8-10 дней (по 10-12 особей в пластмассовой клетке).
Аденокарцинома Эрлиха (АКЭ). Солидная аденокарцинома Эрлиха возникла из спонтанного рака молочной железы мыши в 1905 году. Асцитный вариант был получен в 1932 году путем внутрибрюшинных перевивок солидной аденокарциномы Эрлиха. Опухоль перевивается внутрибрюшинно или подкожно асцитической жидкостью беспородным мышам на 8-12 сутки роста, средняя продолжительность жизни животных составляет 12-20 суток. При внутрибрюшинной перевивке образуется асцит с большим количеством опухолевых клеток. Не метастазирует. В эксперименте использован метод перевивки опухоли: внутрибрюшинно, 7,5 млн клеток в 0,2 мл физиологического раствора. Опыт заканчивали на 9 сутки развития опухоли. Карцинома легких Льюис (3LL). Опухоль возникла спонтанно как карцинома легких мышей линии С57В1/6 в 1951 году. Перевивается на 12-14 сутки роста, средняя продолжительность жизни животных - 24 дня. Метастазирует гематогенно в легкие практически в 100% случаев. Считается, что эта опухоль по чувствительности к противоопухолевым препаратам аналогична солидным опухолям человека: адекватный экспериментальный поиск антиметастатических средств стал возможен лишь после введения в практику метастазирующего рака мышей Льюис. В экспериментах опухоль перевивали внутримышечно, 5 млн клеток в 0,1 мл физиологического раствора. Опыт заканчивали на 21 сутки развития опухоли. Меланома В-16 (В-16). Опухоль возникла спонтанно в коже мыши линии С57В1/6 около глаза в 1954 году. Штамм поддерживается на мышах линии С57В1/6 подкожной перевивкой опухолевой взвеси на 16-20 сутки роста опухоли. Средняя продолжительность жизни - 30-40 дней. Метастазирует преимущественно гематогенно в легкие. В опытах перевивку производили внутримышечно 5 млн опухолевых клеток в 0,1 мл физиологического раствора. Эксперимент заканчивали на 19 сутки развития опухоли. Рак легкого-67 (РЛ-67). Опухоль перевивается на 12-14 сутки роста, средняя продолжительность
жизни мышей - 36 дней. Метастазирует преимущественно гематогенно в легкие практически в 100% случаев.
В опытах перевивали внутримышечно по 5 млн клеток в 0,1 мл физиологического раствора. Эксперимент
заканчивали на 18 сутки развития опухоли.
Трансплантацию солидных опухолей (3LL, В-16, РЛ-67) производили гомогенатом опухолевой ткани
в стерильном физиологическом растворе. Животных-доноров умерщвляли, вырезали кусочки опухоли
без некротических участков и измельчали их через пресс-измельчитель. Полученную массу опухоли разводили
физиологическим раствором и вводили мышам внутримышечно по 5 млн опухолевых клеток в 0,1 мл
физиологического раствора, предварительно подсчитывая их число под микроскопом.
Процент торможения роста опухоли (по массе опухолевого узла или объему опухолевых клеток в асцитном варианте) вычисляли по формуле:
Определение объема клеток опухоли Эрлиха проводилось после центрифугирования асцитической жидкости в мерной пробирке в течение 5 мин при 3000 оборотах. При оценке интенсивности процесса метастазирования использовали несколько критериев:
A1 - частота метастазирования в контрольной группе; А2 - частота метастазирования в опытной группе; B1 - среднее количество метастазов у животных контрольной группы; В2 - среднее количество метастазов у животных опытной группы. По окончании экспериментов животных умерщвляли, соблюдая "Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных", проводили вскрытие, ревизию внутренних органов, выделение опухоли и метастазов. Эффективность проведенных курсов лечения оценивали по противометастатическому и противоопухолевому действию препаратов.
Обработку полученных результатов проводили с использованием непараметрических критериев U -
Вилкоксона-Манна-Уитни и j - углового преобразования Фишера. Различия
считали достоверными при Р<0,05 [ 1 ].
Препарат растворяли в дистиллированной воде и вводили зондом в желудок в дозах 0,384 и 1,024 г/кг
мышам с асцитной опухолью Эрлиха через 24 часа после перевивки и продолжали ежедневно в течение 7 суток;
животным с солидными опухолями - на 4-5 сутки после перевивки и продолжали ежедневно в течение 13-16 суток. Используемые в экспериментах дозы соответствовали рекомендуемым для приема человеку начальной дозировке (по 2 капсулы 3 раза в день) и терапевтической дозе (5 капсул 3 раза в день). Пересчет производился по таблице Freirich E. J, [3] . Контрольные группы животных получали эквиобъемное количество дистиллированной воды в дни введения Маммолептина.
Острая токсичность Маммолептина изучена на 24 беспородных мышах-самках массой 20 г, полученных из
научно-исследовательской лаборатории экспериментального биомоделирования НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН
(сертификат № 161-99).
В эксперименте на беспородных мышах-самках массой 18 г изучено влияние Маммолептина на рост
асцитной опухоли Эрлиха, оценку противоопухолевого действия производили на 9 сутки развития опухоли.
Показано, что курсовое введение животным исследуемого средства в дозе 1,024 г/кг приводило к достоверному
торможению роста опухоли (30%), объем опухолевых клеток при этом уменьшился в 1,4 раза
(Рu<0,01) по сравнению с таковым в контроле. Следует отметить, что в группе мышей,
получавших Маммолептин в дозе 0,384 г/кг прослеживалась тенденция к торможению роста опухоли -
ее объем при этом уменьшился в 1,2 раза по сравнению с контролем, однако это изменение не было
статистически значимым (табл.1). Эксперимент проведен на мышах-самках линии F1(CBA x С57В1/6) массой 18г
с перевиваемым раком легкого-67. Показано, что введение мышам Маммолептина в дозах 0,384 и 1,024 г/кг
достоверно не влияло на рост основного опухолевого узла. Показатели процесса метастазирования у мышей,
леченных Маммолептином в дозе 0,384 г/кг не отличались от контрольных значений. В то же время, у мышей,
получавших Маммолептин в большей дозе {1,024 г/кг), наблюдалась тенденция к уменьшению количества
метастазов (в 1,3 раза), их площади (в 2,9 раза) по сравнению с контрольными значениями и снижению
частоты метастазирования (со 100% в контроле до 8 0%). Однако, описанные изменения не были статистически
значимыми. В эксперименте использовали мышей-самок линии F1(CBA х С57В1/6)
массой 17г. Показано, что Маммолептин в исследуемых дозах не оказывал влияние на развитие меланомы В-16:
масса первичного опухолевого узла в контрольной и опытных группах мышей достоверно не различалась.
Количество метастазов и площадь метастатического поражения в группах животных, получавших курсовое
введение Маммолептина, было на уровне контрольных значений (табл.4). Следует отметить, что частота
метастазирования у нелеченых мышей с меланомой В-16 составила 90%, тогда как введение изучаемого средства
растительного происхождения при использовании в обеих дозах привело к уменьшению этого показателя до 60%
(Рj<0,053). На основании эксперимента по изучению острой токсичности Маммолептина можно сделать вывод о том, что
препарат не обладает токсичностью и может быть отнесен к относительно безвредным веществам (4 класс -
малоопасные по ГОСТ 12.1.007-76). Ответственный исполнитель: |